Descripción

La sección pertenece a la UCIM que se encuentra en la Facultad de Medicina y Odontología, Universidad de València.

Plataforma de imagen

La sección dispone de una gran variedad de equipos que se emplean para realizar imágenes in vivo. Es una técnica no invasiva que permite obtener imágenes ópticas radioactivas y no radioactivas. A partir de las cuales, obtenemos información anatómica y metabólica (función celular). Dependiendo de la técnica empleada, a veces se requiere de la administración de algún agente/contraste tanto radioactivo (radiofármacos) como no radioactivo (agentes bioluminiscentes, fluorescentes, y/o contrates de rayos-X). Una de las ventajas de este tipo de técnicas, es que permiten realizar estudios de evolución de patologías y ver la eficacia del tratamiento.

Asimismo, la plataforma dispone de un equipo de irradiación con rayos-X, que gracias al cual podemos irradiar a animales de investigación, placas, tejidos, células, muestras biológicas, etc. Además, como lleva incorporado una cámara, podemos irradiar y adquirir imágenes al mismo tiempo, una aplicación muy importante en el campo de la radioterapia guiada con imágenes de rayos X.

Plataforma de metabolómica

Esta parte de la sección se encarga de obtener perfiles metabolómicos de muestras líquidas, sólidas y semisólidas. Se obtienen diferentes tipos de espectros a partir de los cuales obtendremos una serie de metabolitos que pueden ser cuantificados. Está cuantificación en algunas ocasiones se realiza con patrones y/o estándares. Los resultados finales pueden expresarse en concentración y su peso molecular.

Además, la sección dispone de una serie de equipos que permiten por un lado obtener los niveles, histogramas y gráficas de dispersión de las diferentes poblaciones celulares sanguíneas (células blancas, glóbulos rojos y plaquetas). Y por el otro lado, las concentraciones de una gran variedad de indicadores bioquímicos en sangre entera, plasma y/o suero.

Procedimiento
  • El/La usuario/a se pondrá en contacto vía correo electrónico, teléfono y/o reunión personal con los/las responsable de cada plataforma para cualquier tipo de consulta relacionada con:
    • Asesoramiento en la elección más adecuada para sus estudios.
    • La preparación de las muestras.
    • Volúmenes necesarios para realizar las mediciones.
    • Pedido de cualquier tipo de agente/contraste y reactivos para las mediciones bioquímicas y hematológicas.
    • Solicitar presupuestos.
    • Reservas de equipos.
    • Cooperación con la sección del animalario.
  • Una vez gestionado la solicitud del usuario, se hará los pedidos necesarios y se reservará los equipos.
  • Tras la finalización de los estudios, el análisis de los resultados será:
    • Envío por correo.
    • Transferirla a un PEN o memoria externa.
Servicios
  • RMN 600MHz:
    En la actualidad, el eje central del laboratorio es un espectrómetro de Resonancia Magnética Nuclear (RMN) de 14,1 Teslas (600 MHz) equipado con 4 sondas de medida. Estas sondas permiten obtener espectros de RMN en una amplia variedad de muestras que incluyen biofluidos (suero, plasma, orina, líquido cefalorraquídeo, lagrimas, medio de cultivo celular, etc.,), tejidos (biopsias de tumores, resecciones, punciones hepáticas entre otras), líneas celulares (cordones umbilicales, hepatocitos).
    Este equipo es un elemento fundamental para el desarrollo del área de la Metabolómica con especial énfasis en sus aplicaciones biomédicas. Algunas de las sondas disponibles permiten trabajar con cantidades de muestra muy pequeñas (4-5 microgramos de tejido y hasta 10 microlitros de líquido).
    Por otro lado el equipo dispone de una sonda de microimagen con 3 diferentes bobinas que permiten obtener Imágenes de Resonancia Magnética en muestras pequeñas con alta resolución y con la posibilidad de obtener una valiosa información molecular.
    • Sonda de HR-MAS; permite obtener el perfil metabólico de tejidos (biopsias, resecciones, punciones) y semisólidos (cultivos celulares). La sonda permite trabajar con cantidades de muestra entre 5 y 25 µg.
    • Sonda de 5 mm; sonda convencional utilizada para la obtención de espectros metabólicos en muestras liquidas incluidas todo tipo de biofluidos. La cantidad de muestra empleada suele ser de 500 µL aunque dependiendo de la concentración inicial se pueden obtener diluciones para volúmenes inferiores.
    • Sonda de 1 mm; muy adecuada para volúmenes de muestra reducidos, podemos trabajar con cantidades de 10-20 µL. Para la medida, la muestra se prepara en unos capilares de 1mm de diámetro. La resolución y calidad del espectro obtenido es comparable a la sonda convencional. Ideal para el estudio de modelos animales donde la disponibilidad de muestra es muy reducida.
    • Sonda de Microimagen; equipada en 3 bobinas diferentes nos permite la obtención de imágenes de resonancia magnética de una altísima calidad para muestras de hasta 1cm2 (biopsias, resecciones, tejido cardiaco, biomateriales).
  • Masas – Gases – HPLC:
    Es un equipo que ofrece alta sensibilidad en el análisis cualitativo y cuantitativo por espectrometría de masas de los analitos de interés en una muestra. Para separar los componentes de la muestra, el espectrómetro de masas, que es el detector, se combina con el paso previo de cromatografía líquida o gases según convenga para el analito. Es una técnica rápida y muy sensible que puede aplicarse a muestras sólidas y líquidas y que puede requerir procesado previo para extracción de los analitos de interés. Todas las muestras tienen un paso previo mínimo de desproteinización y filtrado 0,22µm.
    En cuanto a las aplicaciones:

    • Metabolómica dirigida.
    • Biomarcadores de enfermedad.
    • Análisis farmacocinéticos.
    • Análisis cuantitativo de sustancias químicas.
    • Alimentación y análisis de aguas.
  • Hematología y Bioquímica:
    • Element HT5:
      • Permite determinar los niveles tanto de los glóbulos blancos y rojos como las plaquetas.
      • Obtendremos los niveles de cada población. En caso de los glóbulos blancos, además de los niveles totales, obtendremos los niveles de cada tipo (Neutrófilos, basófilos, eosinófilos…).
      • También los diferentes histogramas de los 3 tipos celulares y las gráficas de dispersión de los glóbulos blancos.
      • En caso de que hubiera valores fuera de los rangos normales, nos indicará de que tipo de patología corresponde.
      • El equipo lleva sus propios reactivos, de manera que el/la usuario/a solo tiene que aportar la muestra de sangre entera en EDTA.
    • Skyla VB1:
      • Los discos “rotores” nos permiten medir indicadores bioquímicos.
      • Disponemos de varios tipos según el tipo de patología:
      Hepático, Renal, Valorar la condición física, Tiroideo, de cuidados intensivos, etc.
      • Además de estos rotores, existen rotores para determinaciones específicas (individuales o dobles), como por ejemplo; Creatinina, BUN, Amilasa, Na + K, ALP + ALT, TRIG + CHOL…
      • El usuario llevará los resultados en un PEN drive.
    • EuroLyser:
      • En este caso disponemos de KITs individuales para cada sustancia.
      • Disponemos de varios tipos de KITs para seguimiento de procesos Inflamatorios (cCRP, SAA, Fibrinógeno); metabólicos (cortisol, lactato); Renal (SDMA); Hepático (GLDH, Amoniaco)…
      • El usuario llevará los resultados en un PEN drive.
    • I STAT-1:
      • En este caso disponemos de unos cartuchos generales y individuales para una sustancia determinada.
      • Los cartuchos generales nos permiten determinar los niveles de gases (O2, CO2…), algunos electrolitos (Na, K, Cl) y los valores de Hgb y Hct.
      • En cuanto a los específicos, tenemos por ejemplo, la troponina I, creatinina…
      • El usuario llevará los resultados en un PEN drive.

El/La usuario/a puede pedir una cita previa, para asesorarlo/la en la elección de la técnica y de todos los posibles contrastes/agentes para los diferentes tipos de estudios y aplicaciones.

La plataforma dispone de 3 equipos diferentes, cada uno con una cámara diferente:

  • MicroTAC:
    Imágenes anatómicas de rayos X tanto 2D como 3D de órganos internos, muestras biológicas (hueso, dientes,…), fósiles, alimentos (ver estructura interna), o cualquier material que sea pueda ver con rayos – X
  • Irradiador + OptiMAX:
    Además de irradiar al animal por el motivo que sea, por ejemplo; mieloablación de la médula ósea, radioterapia oncológica, irradiar células in vitro, etc. También podemos obtener imágenes de alta sensibilidad de bioluminiscencia y radioisótopica (aprovechando la capacidad de la cámara de detectar fotones y transferirlos a electrones que posteriormente son procesados y visualizados), asimismo, imágenes de alto rendimiento de radiografía (Rayos – X, 2D).
    Se pueden realizar imágenes tanto in vivo como in vitro.
  • IVIS:
    • Imágenes de alta sensibilidad de bioluminiscencia y/o fluorescencia. Existe un listado muy amplio de agentes según la aplicación/patología que se quiera estudiar.
    • Líneas celulares oncológicas bioluminiscentes para realizar diferentes tipos de estudios oncológicos y ver la evolución de la enfermedad.
    • Imágenes de irradiación de Cherenkov, aprovechando la capacidad de la cámara de detectar fotones y transferirlos a electrones que posteriormente son procesados y visualizados.
    • Además, imágenes de alto rendimiento de rayos – X, 2D.

    Se pueden realizar imágenes tanto in vivo como in vitro.

Como resultado final, el/la usuario/a obtendrá las imágenes. Estas imágenes serán analizadas y cuantificadas en términos de ROI (Región de Interés) y/o VOI (Volumen de Interés). En caso de las imágenes del Micro TAC, podríamos obtener la densidad ósea.

Equipamiento
  • RMN 600MHz: La espectroscopía por Resonancia Magnética Nuclear (RMN) se define como el estudio de las moléculas mediante el registro de la interacción de radiaciones electromagnéticas de radiofrecuencia con los núcleos de las moléculas ubicadas en un campo magnético externo. Es una técnica utilizada para evaluar el contenido bioquímico de los tejidos vivos, que proporciona información metabólica complementaria a las alteraciones anatómicas que se pueden encontrar en los estudios radiológicos.
  • Masas – Gases – HPLC: Equipo que determina cuantitativamente las concentraciones de una, varias o muchas sustancias en una muestra biológica (suero, plasma, tejido u orina), alimentaria o ambiental. Esto se consigue gracias a una separación cromatográfica de los compuestos presentes en la matriz a estudiar, bien por cromatografía de líquidos o cromatografía de gases y su posterior nebulización con fragmentación para detectar los componentes según su peso molecular.
  • Hematología y Bioquímica:
  • Element HT5:Mediante la incorporación de 3 canales distintos de citometría de flujo “láser”, un conteo de impedancia y una detección colorimétrica permite determinar los niveles tanto de los glóbulos blancos y rojos como las plaquetas.
  • Skyla VB1: Mediante unos discos “rotores” basados en química húmeda y de manera rápida, sencilla y precisa permite mediar diferentes indicadores bioquímicos en sangre entera, plasma y/o suero de diferentes especies (ratas, ratones, cerdos, conejos, perros…). El uso del rotor será dependiendo del tipo de patología a estudiar o para verificar el estado general del animal.
  • EuroLyser: mejora y completa los perfiles bioquímicos de muchas sustancias tal como T4, fructosamina, lipasa pancreática, amoniaco, ácidos biliares, fenobarbital, SDMA, cCRP…etc. Todas las mediciones están basadas en principios de química líquida que proporciona una fiabilidad máxima y todo con manejo simple e intuitivo, y en el mínimo espacio.
  • I STAT-1: Un analizador que mediante unos cartuchos con los reactivos adecuados y según el tipo podemos medir los niveles de gases en sangre (O2, CO2,…), Química y electrolitos y los niveles Hct y Hgb. Además, existen cartuchos individuales para determinar sustancias como Tropninina I, creatinina, etc.
  • Micro TAC: Es un sistema de obtención de imágenes anatómicas en 2D y 3D de los órganos internos. Está técnica utiliza la radiación Rayos – X para obtener secciones o cortes anatómicas con fines de diagnóstico.
  • Irradiador X-RAD 225XL + OptiMAX: permite irradiar modelos in vivo (ratas y ratones) e in vitro (células en cultivo). Además debido al sistema de imagen incorporado (OptiMAX) nos permite adquirir imágenes de bioluminiscencia, rayos X 2D y con radioisótopos.
  • IVIS: permite realizar y analizar imágenes ópticas con agentes bioluminiscente y/o fluorescentes. También, se puede obtener imágenes 2D con rayos X e imágenes con irradiación cherenkov.
Responsable

Mustafa Ezzeddin Ayoub
musez@uv.es

Contacto

Masas – RMN

Mercedes Pardo m.mercedes.pardo@uv.es
Mustafa Ezzeddin musez@uv.es

Hematología y Bioquímica

hemabq@uv.es

Aarón Escrig aaron.escrig@uv.es
Ana Díaz Ana.diaz@uv.es
Aida Artigot M.Aida.Artigot@uv.es
Mercedes Pardo m.mercedes.pardo@uv.es
Mustafa Ezzeddin musez@uv.es

Plataforma de Imagen

micropettac@uv.es

Mustafa Ezzeddin musez@uv.es
Ana Díaz Ana.diaz@uv.es
Aida Artigot M.Aida.Artigot@uv.es

Facultad de Medicina
Avenida Blasco Ibáñez 15,
Zona 6, Sótano – entrada por la rampa del Hospital Clínico Universitario de Valencia.
46010   Valencia