Unidad de Citometría de Flujo

Introducción

La citometría de flujo es una técnica que permite medir y obtener información sobre las características ópticas de células o partículas en suspensión cuando se someten a una fuente de luz láser.

Esta medición se realiza sobre cada partícula individual en base a las características morfológicas: Forward Scatter (FS), relacionado con el tamaño celular y Side Scatter, relacionado con la estructura interna y complejidad citoplasmática y basado en características fluorescentes, pudiendo generar información ya sea con anticuerpos o con sondas fluorescentes de las características biológicas de las diferentes poblaciones celulares.

La citometría de flujo es una técnica rápida y multiparamétrica que permite medir miles de células, pudiendo detectar diferentes poblaciones celulares y parámetros funcionales simultáneamente.

Servicios

• Asesoramiento en la elaboración de protocolos citométricos. Diseño de panel multicolor. Procesamiento de muestras.
• Inmunofenotipo de poblaciones sanguíneas humanas.
• Inmunofenotipo de poblaciones sanguíneas de diferentes especies animales, ratón, rata, cerdo, conejo.
• Estudio de poblaciones celulares en muestras de biopsias.
• Estudio de procesos fisiológicos a nivel celular. Ciclo celular, Apoptosis, Marcadores mitocondriales, Niveles de Ca ++, Estudio del daño del ADN, Estrés oxidativo. Estudio de senescencia.
• Estudio de los niveles de citoquinas intracelulares.
• Separación celular en muestras de cultivo celular así como en diferentes biopsias de tejidos. Separación de células transfectadas con vectores fluorescentes. Separación de poblaciones de leucocitos de interés.
• Separación celular de diferentes poblaciones de muestras biológicas mediante anticuerpos magnéticos.
• Estudio de poblaciones celulares utilizando la imagen celular con el Citómetro ImageStream de Amnis.
• Separación y estudio de esferoides y organoides relacionados con características físicas como diámetro, densidad o peso.
• Análisis de los datos citométricos generados en el servicio con software específico.
• Curso de citometría básica para usuarios.

Equipamiento

Citómetros analizadores

• FACSVerse BD: 3 láseres: 405, 488, 640 nm. 8 parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC).
• LSR Fortessa X-20. BD: 5 Láseres: 355, 405, 488, 561, 640 nm. 18 Parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC).
• Amnis ImageStream. Citómetro de imagen. 1 láser 488. 4 parámetros fluorescentes.

Citómetros separadores

• FACSAria III. BD: 5 Láseres: 355, 405, 488, 561, 640 nm. 16 parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC).

DINÁMICA CELULAR DEL CITÓMETRO. Citómetro físico. Separación por características estructurales.

SEPARADOR DE CÉLULAS MAGNÉTICAS • Separador MACSxpress. MILTENYI BIOITEC S.L. Separación por características magnéticas.

Software de análisis

• ModFit LT. Software de análisis del ciclo celular.
• FACSuite, DIVA, IDEAS, Libra, FlowJo 10.0.